Estabelecimento e otimização de protocolo para obtenção de marcadores microssatélites em Theobroma cacao utilizando sistema multiplex em sequenciador Abi Prism 377. In: Agrotrópica v. 19 p. 73-74, 2007.

Abstract

O uso de marcadores microssatélites em cacau vem crescendo desde o desenvolvimento dos primeiros primers. O objetivo deste trabalho foi estabelecer e otimizar uma metodologia para obtenção desses marcadores em cacau , utilizando o seqüenciador automático ABI Prism 377 no sistema multiplex. A metodologia de extração de DNA e a reação de PCR que vinham sendo utilizadas no laboratório do Centro de Pesquisas do Cacau (CEPEC) para obtenção de microssatélites em géis de agarose foi mantida.Testando diversas diluições , o melhor procedimento foi adicionar 1,5 µL do produto da PCR de cada 3 primers marcados em 25 µL de H2O desionizada e,deste, retirar 3 µL para ser adicionado a 1,5µL do tampão de carregamento.